DPPP (Diphenyl-1-pyrenylphosphine)二苯基-1-芘基膦

（膜特異性的脂質(zhì)過(guò)氧化探針）

產(chǎn)品關(guān)鍵詞：

DPPP 二苯基-1-芘基膦；lipid peroxidation 脂質(zhì)過(guò)氧化；lipid hydroperoxides 脂質(zhì)氫過(guò)氧化物；MeLOOH；Methyl Linoleate亞油suan甲酯；CAS NO：110231-30-6；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

二苯基-1-芘基膦（Diphenyl-1-pyrenylphosphine,DPPP）是一種熒光探針，主要用來(lái)檢測(cè)脂質(zhì)過(guò)氧化。DPPP自身基本無(wú)熒光，一旦以化學(xué)計(jì)量的方式與脂質(zhì)氫過(guò)氧化物反應(yīng)生成強(qiáng)熒光分子-二苯基-1-芘基膦氧化物（DPPP-O）（最大激發(fā)波長(zhǎng)~351nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)~380nm）(見(jiàn)圖1)。DPPP的疏水特性使其輕易插入細(xì)胞膜和脂質(zhì)體，是一款優(yōu)秀的工具用來(lái)研究膜特異性的脂質(zhì)過(guò)氧化。DPPP還能用作一種熒光探針，監(jiān)測(cè)低密度脂蛋白（LDL）和細(xì)胞氧化水平。

圖1.反應(yīng)機(jī)理（來(lái)自文獻(xiàn)）：Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

產(chǎn)品特性

1） CAS NO：110231-30-6

2） 同義名：DPPP; 1-(Diphenylphosphino)pyrene;二苯基(芘-1-基)膦；

3） 分子式：C28H19P

4） 分子量：386.42

5） 外觀：固體

6） 純度：≥95%

7） 溶解性：溶于DMF（~10mg/ml）、二氯甲烷（~1mg/ml）、不溶于水

8） 化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

保存與運(yùn)輸方法

保存：2-8℃避光干燥保存，至少1年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

注意事項(xiàng)

1） 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2） 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用步驟（僅做參考）

1. 細(xì)胞鋪板，培養(yǎng)過(guò)夜；

2. DPPP探針的加載：j 低溫保存的DPPP粉末置于室溫平衡至少30min，往瓶?jī)?nèi)加入無(wú)水DMF，配制成25mM的儲(chǔ)存液；k 用細(xì)胞培養(yǎng)基或生理緩沖液比如：HHBS，稀釋儲(chǔ)存液到所需的工作濃度，比如：25µM；最佳的工作濃度需設(shè)置梯度摸索；l吸走細(xì)胞培養(yǎng)基，用PBS清洗一次；加入新鮮配制的DPPP染色工作液；

3. 37℃避光孵育30min。

4. PBS清洗1~2次，去除多余染料；

5. 【可選】脂質(zhì)過(guò)氧化的誘導(dǎo)：用待研究化合物處理細(xì)胞或使用陽(yáng)性對(duì)照（比如：AAPH）來(lái)誘導(dǎo)脂質(zhì)過(guò)氧化。

6. 熒光測(cè)定：用熒光酶標(biāo)儀、熒光光度計(jì)測(cè)定熒光值；或用帶合適濾片組（Ex：~351nm，Em：380nm）的熒光顯微鏡做成像分析。

染色示例（來(lái)自文獻(xiàn)）

Ref 1）Okimotoa Y, Watanabea A, Nikia E, Yamashitab T, Noguchia N. A novel fluorescent probe diphenyl-1-pyrenylphosphine to follow lipid peroxidation in cell membranes. FEBS Lett. 2000 Jun 2;474(2-3):137-40. doi: 10.1016/s0014-5793(00)01587-8. PMID: 10838073.

實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>：顯微觀察DPPP-O的生成。

實(shí)驗(yàn)方法：PMNs（1×106 cells/ml）懸浮于含1% FBS的HBSS溶液中貼壁培養(yǎng)。DPPP溶于DMSO配制成5mM的儲(chǔ)存液，之后加入細(xì)胞中使其工作濃度為5uM。避光孵育15min后，用含1% FBS的HBSS清洗去除多余染料。待測(cè)樣本置于顯微鏡上，然后加入溶于甲醇的MeLOOH（5uM）。同一視野下監(jiān)測(cè)30min。

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